1. Lisi cellulare:
* Breaking Cells Open: La centrifugazione viene utilizzata per rompere le cellule aperte (come globuli, batteri o cellule vegetali) per rilasciare il DNA. Questo può essere fatto attraverso metodi fisici come il vortice o la sonicazione, ma la centrifugazione aiuta a separare i detriti cellulari dal DNA rilasciato.
* Rimozione dei detriti cellulari: Dopo la lisi, il campione è centrifugato a una velocità relativamente bassa. Detriti cellulari più pesanti, organelli e proteine si sistemano sul fondo, formando un pellet, mentre il DNA rimane nel surnatante (il liquido sopra il pellet).
2. DNA PRECCITAZIONE:
* Separazione del DNA dalla soluzione: Dopo che il DNA viene precipitato fuori dalla soluzione (di solito usando etanolo o isopropanolo), la centrifugazione a una velocità più elevata viene utilizzata per pellet del DNA. Il pellet viene quindi lavato con una soluzione come l'etanolo per rimuovere eventuali contaminanti rimanenti.
* Concentrazione: La centrifugazione può anche essere utilizzata per concentrare il DNA ruotando giù un grande volume di soluzione in un volume più piccolo. Questo è utile quando si lavora con piccole quantità di DNA.
3. Purificazione:
* Rimozione dei contaminanti: La centrifugazione viene utilizzata per rimuovere contaminanti come proteine, lipidi e RNA, che sono spesso presenti insieme al DNA. Diversi protocolli di centrifugazione con velocità e buffer specifici vengono utilizzati per separare selettivamente questi contaminanti.
In sintesi:
* Interruzione cellulare e rimozione dei detriti: La centrifugazione separa i detriti cellulari dal DNA rilasciato.
* DNA PRECCITAZIONE E CONCREPARAZIONE: La centrifugazione pellet del DNA e aiuta a concentrarlo.
* Purificazione: La centrifugazione separa i contaminanti dal DNA, portando a un campione di DNA più pulito e più concentrato.
Usando una combinazione di queste tecniche, la centrifugazione svolge un ruolo vitale nel garantire il successo dell'isolamento e della purificazione del DNA.
