Ecco come funziona:
* Enzimi di restrizione: Questi enzimi sono usati per tagliare sia il DNA plasmidico che il gene di interesse in sequenze specifiche, creando estremità appiccicose (sporgenze complementari).
* enzima ligasi: Questo enzima si comporta come "colla molecolare" e si unisce alle estremità appiccicose del gene e al plasmide insieme, formando un plasmide ricombinante.
La ligasi più comune utilizzata nella biologia molecolare è T4 DNA ligasi .