1. Test del reagente di Kovac:
* Meccanismo: Questo metodo si basa sulla reazione di indolo con p-dimetilaminobenzaldeide (DMAB) , un reagente presente nel reagente di Kovac. In presenza di acido cloridrico (HCl), Indole reagisce con DMAB per formare un composto colorato, rosindole , che appare come un anello di viola rosso all'interfaccia del reagente e del terreno di coltura.
* Passi:
1. Aggiungi alcune gocce del reagente di Kovac alla superficie della coltura batterica.
2. Osservare un anello rosso-viola all'interfaccia.
3. Un test positivo indica la presenza di indolo prodotto dai batteri.
* Specificità: Il reagente di Kovac è altamente specifico per l'indolo e non reagisce con altri metaboliti del triptofano. Tuttavia, altre sostanze come Skatole possono anche produrre una reazione di colore simile.
* Sensibilità: Questo test è abbastanza sensibile da rilevare piccole quantità di indolo.
2. Test del reagente di Ehrlich:
* Meccanismo: Il reagente di Ehrlich, contenente p-dimetilaminobenzaldeide (DMAB) in una miscela di etanolo e acido cloridrico , reagisce con l'indolo per formare un composto colorato rosso-violetto . Questa reazione si verifica a causa della formazione di una struttura chinoidale nel prodotto.
* Passi:
1. Aggiungi una piccola quantità di reagente di Ehrlich alla cultura batterica.
2. Osserva un cambiamento di colore rosso-violetta.
3. Un test positivo indica la presenza di indolo.
* Specificità: Simile al reagente di Kovac, il reagente di Ehrlich è specifico per l'indolo. Tuttavia, potrebbe reagire con altri derivati indole come Skatole.
* Sensibilità: Il reagente di Ehrlich è generalmente considerato meno sensibile del reagente di Kovac.
Altri metodi:
* Cromatografia: L'indolo può essere separato e identificato mediante tecniche di cromatografia liquida a gas cromatografia (GC) o ad alte prestazioni. Questo metodo è più sensibile e specifico dei metodi colorimetrici.
* Spettrofotometria: L'indolo può essere rilevato e quantificato misurando l'assorbanza della sua soluzione a specifiche lunghezze d'onda usando uno spettrofotometro.
produzione indole e suo significato:
* Fonte: Alcuni batteri, in particolare quelli appartenenti al genere *e. coli*, produce indolo come sottoprodotto del metabolismo del triptofano.
* Rilevanza clinica: La capacità di produrre indolo è una caratteristica utilizzata nell'identificazione e nella differenziazione batterica. La produzione di indolo può essere utilizzata per distinguere *e. coli* da altri membri di Enterobacteriaceae.
* Altre applicazioni: L'indolo ha anche un ruolo nel rilevamento del quorum batterico e può influenzare la formazione e la virulenza del biofilm.
Questi test sono strumenti importanti in microbiologia per identificare i batteri e comprendere le loro capacità metaboliche.
