Inoltre, gli enzimi possono anche aumentare la velocità della reazione aumentando la concentrazione effettiva del substrato. Ciò si ottiene legandosi al substrato e mantenendolo in prossimità del sito attivo, che è la parte dell'enzima che catalizza la reazione. Aumentando la concentrazione del substrato, l'enzima aumenta la probabilità che il substrato entri in collisione con il sito attivo e subisca una reazione.
Nel complesso, gli enzimi accelerano la reazione di un substrato diminuendo l'energia di attivazione e aumentando la concentrazione effettiva del substrato. Questi effetti consentono alla reazione di avvenire in modo più rapido ed efficiente, portando ad un aumento della velocità di reazione.