La transilluminazione funziona facendo brillare una luce attraverso un oggetto e poi guardando la luce che passa dall'altra parte. Se l'oggetto è uniforme in spessore e densità, la luce lo attraverserà in modo uniforme e non ci saranno cambiamenti evidenti nell'intensità della luce. Tuttavia, se è presente un'anomalia nell'oggetto, come una cisti piena di liquido o un tumore, la luce verrà assorbita o diffusa dall'anomalia e ci sarà una notevole differenza nell'intensità della luce.
La transilluminazione è una tecnica semplice e non invasiva che può essere utilizzata per diagnosticare una varietà di condizioni mediche. Viene spesso utilizzato insieme ad altre tecniche di imaging, come i raggi X e gli ultrasuoni, per fornire un quadro più completo delle cellule del corpo.