Materiali:
* Tris Base (Tris (idrossimetil) aminometano)
* 1 m Soluzione HCl
* Acqua deionizzata
* PH METER O PH INDICATOR CAPER
* Cilindro graduato
* Beaker
* Mescolare l'asta
Procedura:
1. Calcola la quantità di base Tris:
* Tris ha un peso molecolare di 121,14 g/mol.
* Per preparare 1 litro di soluzione Tris 0,1 M, è necessario:
* 0,1 mol/L * 121,14 g/mol =12,114 g di base Tris
* Regola proporzionalmente l'importo se hai bisogno di un volume diverso di buffer.
2. Sciogliere la base Tris:
* Pesare la quantità calcolata di base Tris e dissolverla in circa 800 ml di acqua deionizzata in un becher da 1 litro.
* Mescola accuratamente per garantire la completa dissoluzione.
3. Regola il pH:
* usando un pH meter: Aggiungere lentamente 1 M HCL Soluzione alla soluzione Tris monitorando continuamente il pH usando un pHmetro. Mescolare bene dopo ogni aggiunta.
* usando la carta indicatore di pH: Aggiungi piccole quantità di HCl fino a raggiungere il pH desiderato di 8,0, come indicato dalla carta PH.
4. Maggiore al volume finale:
* Una volta raggiunto il pH desiderato, aggiungi acqua deionizzata per portare il volume finale a 1 litro.
5. Controlla e regola il pH:
* Riconoscere il pH con un pH o una carta indicatore e effettuare lievi regolazioni con HCl o una soluzione NaOH diluita, se necessario.
Note importanti:
* Sicurezza: La base di Tris è leggermente irritante per la pelle e gli occhi. Indossare occhiali e guanti di sicurezza adeguati durante la manipolazione.
* Calibrazione del pH Meter: Assicurati che il tuo pH sia calibrato correttamente prima dell'uso.
* Effetti di temperatura: Il pH di un tampone Tris dipende leggermente alla temperatura. Sii consapevole di questo se è necessario utilizzare il tampone a temperature significativamente diverse dalla temperatura di calibrazione.
* Storage: Conservare il tampone preparato a temperatura ambiente o in un frigorifero per un accumulo esteso.
Suggerimenti aggiuntivi:
* Regolazione del pH: In genere è più facile regolare il pH aggiungendo HCL piuttosto che sollevarlo aggiungendo NaOH.
* Precisione: Un pHmetro ti darà una lettura più precisa di PH Paper.
* Buffer multipli: Se è necessario preparare diversi buffer, è più efficiente creare una soluzione madre concentrata di Tris e diluirla secondo necessità.
Fammi sapere se hai altre domande.
