Micrografia ottica di un substrato d'oro ultrastabile che migliora la risoluzione di imaging dei criomicroscopi elettronici. ogni buco, che viene utilizzato per supportare campioni congelati nel vuoto del microscopio elettronico, ha un diametro di circa un micrometro. Credito:Cristoforo Russo, MRC-LMB
(Phys.org)—Una coppia di ricercatori del Medical Research Council Laboratory of Molecular Biology dell'Università di Cambridge nel Regno Unito ha trovato un modo per superare il problema del movimento di molte proteine quando ha tentato di studiarle utilizzando la criomicroscopia elettronica. Nel loro articolo pubblicato sulla rivista Scienza , Christopher Russo e Lori Passmore descrivono come hanno creato una struttura di supporto basata su un substrato d'oro che sembra risolvere il problema.
Come nota la coppia di ricercatori, fino ad ora è stato difficile saperne di più su molte proteine usando la criomicroscopia elettronica perché si muovono sotto il raggio, che si traduce in immagini sfocate e difficoltà nell'effettuare misurazioni. Spiegano inoltre che il motivo per cui ciò si verifica è dovuto alle instabilità nei substrati di carbonio generalmente utilizzati per supportare i campioni al microscopio (che vengono congelati per aumentare la stabilità). In questo nuovo sforzo, i ricercatori descrivono la loro nuova tecnica, che ritengono offra un modo per aggirare questo problema introducendo substrati di supporto realizzati in oro. Hanno modellato una struttura di supporto approssimativamente simile a quelle basate su substrati di carbonio, quindi hanno allungato una pellicola d'oro di soli 500 angstrom di spessore su un supporto reticolare quadrato e hanno finito posizionando le proteine congelate in fori di 1,2 micrometri che avevano fatto nel film. Il film e il supporto d'oro, hanno notato, assicurava una conduttività elettrica uniforme e una contrazione termica mentre i campioni di proteine venivano congelati.
La coppia di ricercatori suggerisce che l'oro si presta all'applicazione per diversi motivi:è altamente resistente alle radiazioni e quindi più stabile, è chimicamente inerte ed è sia biocompatibile che elettricamente conduttivo.
Per testare il loro processo, hanno scansionato l'apoferritina, una proteina con un complesso sferico che si è dimostrato eccezionalmente difficile da studiare con la criomicroscopia elettronica, usando sia la vecchia tecnica che quella nuova che avevano sviluppato. Riferiscono che durante il test con il substrato d'oro, il campione ha mostrato pochissimo movimento, (sia sul piano verticale che su quello dell'oggetto) consentendo di scattare immagini molto migliori di quelle che erano in grado di ottenere quando utilizzavano un substrato di carbonio. Riferiscono inoltre che a causa del movimento ridotto, sono stati in grado di avvicinarsi al campione mentre venivano eseguite le scansioni. Credono che il loro metodo funzionerà probabilmente con tutta una serie di altre proteine che dovrebbero tenere occupati altri ricercatori per un periodo piuttosto lungo.
Resa artistica di un substrato d'oro ultrastabile che migliora la risoluzione di imaging dei criomicroscopi elettronici. ogni buco, che viene utilizzato per supportare campioni congelati nel vuoto del microscopio elettronico, ha un diametro di circa un micrometro. Credito:Lesley McKeane/Christopher Russo, MRC-LMB
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