1. Raccolta del DNA:
- Viene raccolto un piccolo campione di cellule da un individuo, solitamente dall'interno della guancia, dal sangue o da altri fluidi corporei.
- Il campione viene quindi inviato a un laboratorio per l'estrazione del DNA.
2. Estrazione del DNA:
- Il campione cellulare viene sottoposto a un processo di estrazione del DNA per isolare e purificare il DNA.
- Questo processo comporta la rottura delle membrane cellulari e la rimozione delle proteine e di altro materiale cellulare.
- Il risultato finale è un campione concentrato di DNA.
3. Amplificazione del DNA:
- Il campione di DNA estratto è troppo piccolo per l'analisi diretta, quindi deve essere amplificato per creare milioni di copie di specifiche regioni del DNA.
- Questo viene fatto utilizzando una tecnica chiamata reazione a catena della polimerasi (PCR).
- La PCR utilizza enzimi specializzati e cicli di temperatura per creare copie multiple delle regioni del DNA di interesse.
4. Elettroforesi su gel:
- I frammenti di DNA amplificati vengono separati in base alla loro dimensione utilizzando una tecnica chiamata elettroforesi su gel.
- I frammenti di DNA vengono posti in un gel di agarosio e attraverso di esso viene fatta passare una corrente elettrica.
- I frammenti di DNA più piccoli si muovono più velocemente attraverso il gel, mentre i frammenti più grandi si muovono più lentamente.
5. Visualizzazione e analisi:
- Dopo l'elettroforesi, il gel viene colorato con uno speciale colorante che si lega al DNA.
- I frammenti di DNA vengono quindi visualizzati sotto una luce UV, creando bande visibili sul gel.
- Lo schema delle bande è unico per ogni individuo e viene definito profilo DNA.
6. Confronto:
- Il profilo del DNA del campione sconosciuto viene confrontato con un campione di riferimento noto, come un campione proveniente da una scena del crimine o da un database del DNA.
- Se i modelli delle bande corrispondono, ciò suggerisce che i campioni di DNA appartengono allo stesso individuo.
- Se ci sono differenze nei modelli delle bande, significa che i campioni di DNA provengono da individui diversi.
7. Analisi statistica:
- Nei casi forensi, viene eseguita un'analisi statistica per determinare la probabilità che due profili DNA corrispondano per caso.
- Si tratta di calcolare la frequenza delle variazioni specifiche del DNA (alleli) nella popolazione.
- Un'elevata probabilità di corrispondenza fornisce una prova evidente che i campioni di DNA appartengono allo stesso individuo.
La profilazione del DNA è una tecnica potente ampiamente utilizzata in vari campi, tra cui la scienza forense, i test di paternità, la diagnosi medica e la ricerca genetica. Fornisce un'identificazione e un'analisi accurata e affidabile dei campioni di DNA, rendendolo uno strumento essenziale sia in contesti scientifici che legali.
