1. Degradazione dell'RNA: Gli enzimi RNase colpiscono specificamente e abbattono le molecole di RNA in frammenti più piccoli. Ciò è essenziale perché l'RNA può interferire con applicazioni a valle come PCR, clonazione e sequenziamento.
2. Degrado selettivo: Gli enzimi RNasi sono progettati per essere altamente specifici per l'RNA, il che significa che non influenzano l'integrità delle molecole di DNA durante il processo di purificazione.
3. Purity migliorata: Eliminando la contaminazione da RNA, il trattamento con RNase migliora la purezza del DNA isolato, portando a risultati più affidabili e accurati nelle analisi successive.
4. Rimozione di RNase: Dopo la digestione dell'RNA, la stessa RNase viene spesso rimossa dalla soluzione di DNA usando metodi come l'inattivazione del calore o usando specifici inibitori di RNasi.
Perché è importante la rimozione dell'RNA?
* Interferenza con applicazioni a valle: L'RNA può interferire con applicazioni basate sul DNA come la PCR agendo come modello o inibendo l'enzima della polimerasi.
* Falsi positivi: L'RNA può causare falsi positivi nel sequenziamento del DNA generando letture che non rappresentano la vera sequenza di DNA.
* Contaminazione dei campioni: L'RNA può contaminare campioni e portare a una quantificazione imprecisa del DNA.
Conclusione:
RNase svolge un ruolo vitale nella purificazione del DNA degradando selettivamente l'RNA, garantendo che il prodotto finale sia puro e adatto a varie applicazioni a valle. Aiuta a eliminare la contaminazione dell'RNA, migliorando l'accuratezza e l'affidabilità delle analisi basate sul DNA.
