1. Antiossidante:l'acido ascorbico è un potente antiossidante che aiuta a proteggere il DNA dal danno ossidativo. Durante le procedure di estrazione del DNA, vari reagenti e fattori ambientali possono generare specie reattive dell'ossigeno (ROS) che possono causare l'ossidazione del DNA e la rottura del filamento. L'acido ascorbico elimina questi radicali liberi e minimizza il danno al DNA, preservando così l'integrità del materiale genetico estratto.
2. Agente riducente:l'acido ascorbico subisce reazioni redox e agisce come agente riducente nell'estrazione del DNA. Aiuta a mantenere l'ambiente riducente necessario per alcuni metodi di estrazione del DNA, in particolare quelli che comportano l'uso di determinati tamponi di lisi o agenti chelanti. Riducendo gli agenti ossidanti presenti nei tamponi di estrazione, l'acido ascorbico previene l'ossidazione del DNA e ne facilita l'efficace estrazione.
3. Inibizione delle nucleasi:le nucleasi sono enzimi che possono degradare il DNA, compromettendo potenzialmente la resa e la qualità del DNA estratto. L'acido ascorbico possiede effetti inibitori su alcune nucleasi, come DNasi e RNasi. Inibendo l'attività di queste nucleasi, l'acido ascorbico aiuta a preservare l'integrità delle molecole di DNA durante il processo di estrazione, riducendo il rischio di degradazione del DNA.
4. Miglioramento della precipitazione del DNA:l'acido ascorbico può migliorare la precipitazione del DNA dopo l'estrazione. Ciò è particolarmente rilevante nei metodi che utilizzano la precipitazione di alcol per isolare il DNA. L'acido ascorbico promuove la formazione di precipitati di DNA stretti e compatti, facilitando la raccolta del pellet di DNA durante la centrifugazione. Ciò facilita le fasi successive della purificazione del DNA e delle applicazioni a valle.
Nel complesso, l’acido ascorbico contribuisce alla protezione, stabilizzazione ed efficiente estrazione del DNA agendo come antiossidante, agente riducente, inibitore della nucleasi e potenziatore della precipitazione. La sua inclusione nei protocolli di estrazione del DNA aiuta a garantire l'integrità e la qualità del materiale genetico estratto per varie applicazioni di biologia molecolare.
