Tuttavia, ci sono prove che suggeriscono che gli eucarioti potrebbero essersi evoluti anche prima, possibilmente intorno a 3,5 BYA . Questa prova proviene da:
* Analisi dei biomarcatori: Molecole specifiche trovate nelle rocce antiche suggeriscono la presenza di organismi simili a eucariotici anche prima delle prime prove fossili.
* Analisi genetica: I confronti del materiale genetico tra diversi organismi indicano un'origine molto più anziana per gli eucarioti.
Pertanto, mentre la prima evidenza fossile concreta di cellule eucariotiche risale a 2,7 BYA , la loro origine può essere molto prima, probabilmente tra 3,5 e 2,7 BYA .