Ecco come funziona:
1. Preparazione del campione di sangue: Il campione di sangue viene in genere trattato con un tampone di lisi per aprire le cellule e rilasciare il loro contenuto, incluso il DNA.
2. Centrifugazione: Il campione lisato viene quindi centrifugato ad alta velocità, creando un gradiente di densità.
3. Gradiente di saccarosio: Una soluzione di saccarosio è stratificata sopra il campione lisato. Questa soluzione ha un gradiente di aumento della concentrazione di saccarosio, creando un gradiente di aumento della densità.
4. Separazione: Durante la centrifugazione, diversi componenti cellulari migreranno in posizioni nel gradiente in cui la loro densità corrisponde alla concentrazione di saccarosio circosica circospeggiante. Il DNA, essendo relativamente denso, si stabilizzerà su uno strato specifico all'interno del gradiente.
5. Collezione: Lo strato contenente il DNA viene quindi raccolto e ulteriormente purificato per rimuovere eventuali contaminanti rimanenti.
Pertanto, il saccarosio non è direttamente coinvolto nella rottura delle cellule o nell'isolamento del DNA stesso. Invece, agisce come un mezzo gradiente di densità Per facilitare la separazione del DNA da altri componenti cellulari.
Nota importante: Mentre il saccarosio viene utilizzato in alcuni protocolli di isolamento del DNA, altri metodi possono utilizzare diversi media di gradiente di densità come il cloruro di cesio (CSCL).