Comprensione dei batteri anaerobici
I batteri anaerobici sono organismi che possono sopravvivere e crescere in assenza di ossigeno. Possono anche essere danneggiati o uccisi dalla presenza di ossigeno.
Metodi per determinare la natura anaerobica
1. Tecniche di coltura:
* Jar/Camera anaerobico: Il metodo più comune e affidabile.
* Metti la piastra di Petri in un barattolo o camera anaerobico sigillato.
* Rimuovere l'ossigeno dalla camera usando un pacchetto chimico (ad esempio un sistema di generazione di gas come Gaspak) o scaricando la camera con gas azoto.
* Se i batteri crescono bene all'interno dell'ambiente anaerobico, suggerisce fortemente che sono anaerobici.
* Cultura di agar profonde:
* Preparare un tubo di agar profondo o una piastra.
* Iniettare i batteri nell'agar, garantendo che i batteri siano solo sul fondo del tubo o dell'agar in cui i livelli di ossigeno sono bassi.
* Se la crescita è solo nella parte inferiore del tubo, indica una crescita anaerobica.
2. Indicatori:
* Resazurin: Questa sostanza chimica è un indicatore redox che cambia colore in presenza di ossigeno.
* Aggiungi una piccola quantità di rosazurina ai tuoi media di cultura.
* Se i media rimangono rosa (forma ridotta), suggerisce un ambiente anaerobico e i batteri sono probabilmente anaerobici. Se diventa blu (forma ossidata), è presente ossigeno.
3. Test biochimici:
* Test di nitrato reduttasi: Alcuni batteri anaerobici usano il nitrato come accettore di elettroni in assenza di ossigeno. Un risultato positivo in questo test indica la capacità di ridurre il nitrato al nitrito.
* Test della catalasi: I batteri anaerobici in genere mancano dell'enzima catalasi, che abbatte il perossido di idrogeno. Un test di catalasi negativa è indicativo del metabolismo anaerobico.
Considerazioni importanti:
* Piatti di controllo: Usa sempre le piastre di controllo (sia aerobiche che anaerobiche) per il confronto. Ciò garantisce che i risultati siano validi.
* Esame microscopico: Sebbene non conclusivo, osservare la morfologia dei batteri può fornire suggerimenti. Alcuni batteri anaerobici hanno forme distintive (ad es. Clostridi sono a forma di asta e spesso formano spore).
* Test aggiuntivi: Test più complessi, come l'analisi del genoma batterico o l'esecuzione dell'analisi della catena di trasporto di elettroni, possono fornire un'ulteriore conferma del metabolismo anaerobico.
Disclaimer:
È importante notare che mentre questi metodi possono aiutare a determinare la probabile natura anaerobica dei tuoi batteri, potrebbero non essere conclusivi. Per un'identificazione accurata e ulteriori studi, potrebbe essere necessario consultare un microbiologo o utilizzare tecniche più specializzate.
