1. Frazionamento cellulare:
* Questa è una tecnica classica che coinvolge omogeneizzazione (Breaking Open) cellule, seguite da centrifugazione differenziale .
* Omogeneizzazione Può essere ottenuto utilizzando vari metodi come la miscelazione, la sonicazione o l'uso di una stampa francese.
* Centrifugazione differenziale separa i componenti cellulari in base alle loro dimensioni e densità. Gli organelli più pesanti (come i nuclei) sedimenti prima a velocità più basse, mentre gli organelli più leggeri (come i ribosomi) sedimenti a velocità più elevate.
2. Centrifugazione del gradiente di densità:
* Questa tecnica perfeziona il frazionamento cellulare stratificando un gradiente di soluzioni con l'aumentare della densità (ad esempio saccarosio) su un campione di cellule omogeneizzate.
* Gli organelli migrano sullo strato di densità che corrisponde alla propria densità, consentendo un'ulteriore purificazione.
3. Citometria a flusso:
* Questa tecnica utilizza raggi laser per analizzare e ordinare singole cellule in base alle loro proprietà di dimensioni, forma e fluorescenza.
* Può essere usato per isolare tipi di cellule specifici che contengono l'organello desiderato.
4. Immunoprecipitazione:
* Questa tecnica utilizza anticorpi per legarsi specificamente alle proteine target associate a organelli specifici.
* Aggiungendo perline rivestite con gli anticorpi, l'organello contenente la proteina target può essere tirato fuori dalla soluzione.
5. Separazione magnetica:
* Questa tecnica utilizza perle magnetiche rivestite con anticorpi contro specifiche proteine di organelle.
* Le perle si legano agli organelli target, permettendo loro di essere estratti usando un magnete.
6. Cromatografia di affinità:
* Questa tecnica utilizza una colonna ricca di un ligando specifico che si lega all'organello target.
* Gli organelli si legano al ligando, mentre altri componenti cellulari passano attraverso la colonna.
7. Microfluidica:
* Questa tecnica utilizza dispositivi microfluidici per manipolare e separare cellule e organelli in base alle dimensioni, alla forma e alle proprietà della superficie.
La scelta della tecnica dipende dallo specifico organello isolato e dalla purezza e dalla quantità desiderata.
