Ecco perché:
* Enzimi di restrizione: Questi sono enzimi che riconoscono e tagliano specificamente il DNA in sequenze specifiche chiamate siti di restrizione. Questi enzimi sono come forbici molecolari, consentendo agli scienziati di tagliare con precisione il DNA vettoriale in una posizione desiderata.
* DNA vettoriale: Questa è la molecola di DNA che funge da vettore per fornire il gene di interesse in una cellula ospite. Di solito contiene elementi essenziali come un'origine di replica, un marcatore selezionabile e un sito di clonazione multiplo (MCS).
* Cleavage: Ciò si riferisce al processo di taglio della molecola di DNA, consentendo l'inserimento del gene di interesse.
Come funziona:
1. Riconoscimento del sito di restrizione: L'enzima di restrizione si lega al suo sito di restrizione specifico sul DNA vettoriale.
2. scissione: L'enzima taglia la molecola di DNA nel sito di restrizione, creando estremità appiccicose (DNA a singolo filamento a strapiombo) o estremità contunose (senza sporgenze).
3. Inserzione del gene: Il gene di interesse, che è stato tagliato con lo stesso enzima di restrizione, può essere inserito nel DNA vettoriale di taglio a causa dell'accoppiamento di base complementare.
Questo processo consente la creazione di molecole di DNA ricombinante, che vengono quindi introdotte nelle cellule ospiti per l'espressione del gene desiderato.
