Di Elliot Walsh, aggiornato il 24 marzo 2022

I batteri sono gli organismi più prolifici del pianeta, con oltre un trilione di specie e più di cinque milioni di trilioni di trilioni individui. Sebbene meno dell'1% di questi microbi causi malattie negli esseri umani, la loro entità può variare da lievi disturbi di stomaco a infezioni potenzialmente letali come la peste bubbonica, che secondo le stime uccise 50 milioni di persone nel XIV secolo.

Antibiotici e loro meccanismi d'azione

Gli antibiotici colpiscono selettivamente le strutture e i processi batterici, risparmiando le cellule umane. Le classi comuni includono:

• Beta‑lactams (ad esempio, penicillina) interrompono la sintesi della parete cellulare, portando alla lisi batterica.
• Macrolidi (ad esempio, l'eritromicina) legano i ribosomi batterici, bloccando la sintesi proteica.
• Chinoloni interferire con la replicazione del DNA inibendo la girasi e la topoisomerasi IV.

Testare la resistenza agli antibiotici

A partire dagli anni ’20, i batteri hanno sviluppato una resistenza, spingendo allo sviluppo di test di sensibilità standardizzati. I primi metodi prevedevano diluizioni seriali di colture batteriche su piastre cariche di antibiotici, operazioni variabili e dispendiose in termini di tempo.

Il test di diffusione del disco Kirby‑Bauer

Standardizzato dai microbiologi W.M.M.Kirby e A.W.Bauer, il test Kirby‑Bauer rimane lo standard di riferimento per uno screening rapido e affidabile della resistenza. La procedura è semplice:

1. Strisciare un isolato batterico puro su una piastra di agar.
2. Posizionare i dischetti carichi di antibiotico sulla superficie; ogni dischetto contiene un antibiotico specifico.
3. Incubare la piastra in condizioni ottimali.

Man mano che l’antibiotico si diffonde verso l’esterno, i batteri sensibili vengono inibiti, creando un’area chiara e circolare priva di crescita attorno a ciascun disco, nota come zona di inibizione. La dimensione di questa zona riflette direttamente la sensibilità batterica:zone più grandi indicano una maggiore suscettibilità; zone più piccole suggeriscono resistenza.

Misurare la zona di inibizione

Una misurazione accurata è fondamentale per interpretare i risultati. Segui questi passaggi:

1. Posizionare la piastra di agar su una superficie non riflettente.
2. Utilizzando un righello o un calibro millimetrico, posizionare il segno zero al centro del disco antibiotico.
3. Misurare dal centro del disco al bordo esterno della zona di inibizione (raggio). Moltiplicare per due per ottenere il diametro o misurare direttamente attraverso la zona (diametro).

Tutte le misurazioni devono essere registrate in millimetri (mm).

Utilizzare le tabelle di riferimento CLSI per interpretare il diametro rispetto alla specie batterica e all'antibiotico. Questi grafici possono essere trovati qui .