Il metodo prevede il posizionamento di un disco di carta standardizzato impregnato con una concentrazione specifica dell'agente antimicrobico sulla superficie di una piastra di agar inoculata con il ceppo batterico in esame. Le piastre vengono quindi incubate per consentire la crescita batterica e la diffusione dell'agente antimicrobico dal disco nell'agar.
Dopo l'incubazione, le piastre vengono esaminate per verificare la presenza di una zona chiara di inibizione attorno al disco. La zona di inibizione rappresenta l'area in cui la crescita batterica è stata impedita grazie all'attività antimicrobica dell'agente. Il diametro della zona di inibizione viene misurato e confrontato con tabelle standard di riferimento per determinare la suscettibilità o la resistenza del ceppo batterico all'agente antimicrobico.
Il metodo di diffusione del disco fornisce una valutazione qualitativa o semiquantitativa della sensibilità antimicrobica. Può essere utilizzato per valutare l'efficacia di diversi agenti antimicrobici contro un particolare ceppo batterico, per confrontare la sensibilità di diversi ceppi batterici allo stesso agente antimicrobico e per monitorare lo sviluppo della resistenza antimicrobica.
Questo metodo è comunemente impiegato nei laboratori clinici, negli ambienti di ricerca e nelle industrie farmaceutiche per valutare l'efficacia degli agenti antimicrobici e guidare la terapia antibiotica appropriata nella pratica clinica.