Ecco una rottura del perché i plasmidi sono così importanti in questo campo:
* Struttura circolare: I plasmidi sono piccoli pezzi circolari di DNA trovati naturalmente nei batteri. La loro forma circolare li rende molto stabili e meno inclini al degrado.
* Auto-replicazione: I plasmidi hanno la loro origine di replicazione, il che significa che possono replicare indipendentemente dal cromosoma batterico. Ciò consente la creazione di molte copie del gene inserito.
* Facilità di manipolazione: I plasmidi possono essere facilmente tagliati e incollati con enzimi e ligasi di restrizione, rendendoli ideali per inserire il DNA estraneo.
* Marcatori di selezione: I plasmidi spesso trasportano geni di resistenza agli antibiotici, consentendo agli scienziati di selezionare facilmente per i batteri che hanno assunto il plasmide.
Come vengono utilizzati i plasmidi nel DNA ricombinante:
1. Tagliare e incollare: Il gene desiderato viene isolato e tagliato usando un enzima di restrizione, creando "estremità appiccicose" complementari. Lo stesso enzima di restrizione viene utilizzato per tagliare il plasmide.
2. Inserzione: Il gene viene inserito nel plasmide tagliato usando il DNA ligasi, che sigilla il DNA insieme.
3. Trasformazione: Il plasmide ricombinante viene introdotto in batteri usando tecniche come scosse di calore o elettroporazione.
4. Selezione: I batteri sono coltivati su un mezzo contenente antibiotico. Solo i batteri che hanno ripreso il plasmide con il gene della resistenza agli antibiotici sopravviveranno e si moltiplicheranno.
5. Espressione: I batteri che trasportano il plasmide ricombinante esprimono il gene inserito, producendo potenzialmente la proteina desiderata.
In sintesi: I plasmidi sono strumenti incredibilmente preziosi nella tecnologia del DNA ricombinante grazie alla loro struttura circolare, autoreplicazione, facilità di manipolazione e marcatori di selezione. Consentono agli scienziati di inserire ed esprimere geni nei batteri, portando alla produzione di prodotti preziosi come insulina, antibiotici e vaccini.
