Un ospite di clonazioni è un organismo vivente, in genere un batterio, un lievito o persino una cellula vegetale, che viene utilizzato per replicare ed espresso La molecola di DNA ricombinante. Ciò significa che svolge un ruolo cruciale nell'intero processo di tecnologia del DNA ricombinante. Ecco come:
1. Replica:
* L'host di clonazione fornisce gli enzimi e macchinari necessari per replicare la molecola di DNA ricombinante. Ciò include la DNA polimerasi, la ligasi e altri enzimi essenziali per la replicazione del DNA.
* L'origine di replica dell'host Consente la replicazione autonoma della molecola di DNA ricombinante, generando più copie.
2. Espressione:
* L'host di clonazione contiene il meccanismo di trascrizione e traduzione necessaria per esprimere il gene inserito nella molecola di DNA ricombinante. Ciò significa che la cellula ospite può leggere il codice genetico sul DNA ricombinante e produrre la proteina desiderata.
* I ribosomi dell'host e altri fattori di traduzione sono essenziali per la sintesi proteica.
* Elementi normativi specifici, come promotori e terminatori, presenti nel vettore, assicurano che il gene sia espresso correttamente nell'ospite.
3. Selezione e amplificazione:
* Gli host di clonazione spesso possiedono marcatori selezionabili , geni che conferiscono resistenza agli antibiotici o ad altri agenti selettivi. Ciò consente ai ricercatori di identificare e selezionare facilmente le cellule ospiti che hanno assunto con successo il DNA ricombinante.
* Coltivando le cellule ospiti trasformate in un mezzo selettivo, solo le cellule contenenti il DNA ricombinante sopravviveranno e si moltiplicano, portando a amplificazione del gene desiderato.
4. Produzione del prodotto desiderato:
* Il gene clonato può essere espresso nella cellula ospite per produrre la proteina desiderata o altra molecola.
* Questa proteina può essere raccolta per varie applicazioni, come trattamenti medici, applicazioni industriali o scopi di ricerca.
In sintesi:
L'ospite di clonazione funge da fabbrica per la produzione della proteina o della molecola desiderata codificata dal DNA ricombinante. Fornisce gli strumenti necessari per replicare il DNA, esprimere il gene e produrre il prodotto finale. La scelta dell'ospite di clonazione è cruciale e dipende da fattori come il tipo di gene, il prodotto proteico desiderato e l'applicazione specifica.
Esempi di host di clonazione:
* Batteri: *E. COLI* è l'ospite di clonazione più utilizzato per la sua facilità di crescita, il tasso di replica rapido e la genetica ben caratterizzata.
* lievito: * Saccharomyces cerevisiae* viene utilizzato per produrre proteine che richiedono modifiche post-traduzionali.
* Cellule di mammifero: Le cellule CHO e le cellule HEK293 sono usate per esprimere proteine eucariotiche complesse.
Comprendendo il ruolo degli ospiti di clonazione nella tecnologia del DNA ricombinante, possiamo apprezzare la complessa interazione di fattori che ci consentono di manipolare le informazioni genetiche e sfruttare il suo potenziale per diverse applicazioni.
