Ecco perché:
* Batteri gram-positivi avere uno spesso strato peptidoglicano nella parete cellulare. Questo strato intrappola il colorante a viola di cristallo durante il processo di colorazione, che quindi forma un complesso con lo iodio. Questo complesso è grande e difficile da rimuovere con alcol, con conseguenti batteri che rimangono viola.
* batteri gram-negativi Avere uno strato peptidoglicano più sottile e una membrana esterna contenente lipopolisaccaride (LPS). L'alcool utilizzato nel processo di colorazione dissolve la membrana esterna e lava via il complesso di viola di cristallo, lasciando i batteri incolori. Quindi prendono la controposta (Safranin), apparendo rosa.
Pertanto, le differenze nella struttura e nella composizione della parete cellulare sono i determinanti chiave dei risultati della colorazione Gram.