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  • Preparazione diretta di una coltura batterica pura:guida passo passo

    Jupiterimages/Photos.com/Getty Images

    Il corpo umano ospita circa nove volte più cellule batteriche rispetto alle cellule umane. In microbiologia, una cultura pura si riferisce a una preparazione di laboratorio, come una capsula di Petri, che contiene una singola specie batterica. Identificare e isolare tale specie è essenziale per una caratterizzazione accurata e applicazioni a valle.

    John Foxx/Stockbyte/Getty Images

    1. Sterilizzare l'ansa di inoculazione

    Accendere un becco Bunsen e far passare l'ansa di inoculo attraverso la parte più calda della fiamma finché non diventa rossa. Questo passaggio elimina eventuali microbi residui.

    2. Raccogli i batteri

    Lasciare raffreddare il circuito per circa 10 secondi, quindi immergerlo delicatamente nel campione microbico.

    3. Prima serie

    Aprire la piastra di agar e far scorrere l'anello avanti e indietro su circa un terzo della superficie della piastra. Risterilizzare l'anello sulla fiamma.

    4. Seconda serie

    Toccare l'ansa con una regione non inoculata dell'agar per raffreddarla. Ruotare la piastra in modo che la sezione inoculata si trovi a sinistra o a destra, quindi far scorrere più volte l'ansa attraverso l'area inoculata e attraverso il terzo superiore della superficie rimanente. Risterilizzare l'anello.

    5. Terza serie

    Raffreddare l'ansa su un'area pulita dell'agar, ruotare la piastra di altri 90° e trascinare l'ansa attraverso la zona precedentemente inoculata prima di passare sulla restante area non inoculata.

    6. Incubare la piastra

    Posizionare la piastra in un'incubatrice (o a temperatura ambiente) e attendere fino alla comparsa delle colonie visibili, in genere da 24 a 48 ore o più a seconda dell'organismo.

    7. Trasferire i batteri isolati

    Risterilizzare una nuova ansa di inoculazione. Mettila a contatto con una singola colonia ben formata sulla piastra, quindi trasferiscila in una provetta inclinata di agar o in una provetta di brodo nutriente.

    8. Incubare la cultura pura

    Incubare lo slant o il brodo nelle stesse condizioni di prima. Dopo una crescita sufficiente, la coltura sarà una preparazione batterica pura.

    Cose necessarie

    • Campione microbico
    • Ansa di inoculazione
    • Bruciatore Bunsen
    • Piatta di agar
    • Provetta inclinata di agar o brodo nutriente

    TL;DR (troppo lungo; non letto)

    Strisciando una piastra in fasi successive si diluisce la carica batterica, consentendo la formazione di colonie individuali. Evitare un'eccessiva contaminazione incrociata tra le zone delle strisce. L'incubazione può avvenire a temperatura ambiente, ma l'utilizzo di un incubatore controllato ottimizza le condizioni di crescita per l'organismo specifico.

    Avviso

    Quando si lavora con microrganismi sconosciuti, la sicurezza è fondamentale:indossare guanti, sterilizzare accuratamente le superfici dopo l'esposizione e assicurarsi che l'ansa di inoculo sia sterilizzata prima e dopo ogni passaggio.

    Fratello
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