1. Rilegatura del complesso di riconoscimento dell'origine (ORC):
- ORC è un complesso proteico che riconosce e si lega a specifiche sequenze di DNA chiamate sequenze che si replicano autonomamente (ARS) nel lievito o origini di replicazione del DNA in altri eucarioti.
- L'ORC può legarsi al DNA anche prima che inizi la replicazione del DNA.
2. Reclutamento di proteine aggiuntive:
- Una volta che l'ORC si è legato al DNA, recluta proteine aggiuntive, tra cui Cdc6 e Cdt1, per formare un complesso di pre-replicazione (pre-RC).
3. Fattori di licenza:
- I fattori di licenza, come Cdc6 e Cdt1, sono essenziali per l'inizio della replicazione del DNA.
- Cdc6 impedisce il riavvio della replicazione del DNA nelle origini che si sono già attivate.
4. Assemblaggio della DNA elicasi e della forcella di replica:
- Al momento opportuno del ciclo cellulare, il pre-RC viene attivato da fattori aggiuntivi, incluso il complesso elicasi MCM (mantenimento del minicromosoma).
- L'elicasi MCM svolge la doppia elica del DNA, creando una bolla di replicazione attorno all'origine e vengono assemblate due forcelle di replicazione, ciascuna che si muove in direzioni opposte.
5. Allungamento e risoluzione:
- Le DNA polimerasi estendono i filamenti di DNA alle forche di replicazione, sintetizzando nuovo DNA utilizzando il DNA parentale svolto come modello.
- La replicazione del DNA continua fino alla replicazione dell'intero genoma.
- La terminazione della replica avviene quando i fork di replica raggiungono sequenze di terminazione specifiche o quando entrano in collisione tra loro.
È importante notare che i meccanismi dettagliati di stabilimento e attivazione dell'origine della replicazione possono variare tra diverse specie e tipi di cellule. La presenza di molteplici origini di replicazione garantisce una replicazione del DNA efficiente e coordinata dei grandi genomi eucariotici.